空間分辨率達到1~10 μm的醫學CT稱為顯微CT(microCT),與之對應的是肉眼分辨水平的CT,稱為宏觀CT。細胞直徑平均為10~50 μm,而細胞器約為0.2~1 μm。所以,microCT是“能看見組織和細胞圖像的CT”。由于普通CT無法滿足科學研究對分辨率的苛刻要求,學術界開始研發microCT。其主要構造由六部分組成(圖1)。microCT與普通CT不同之處是采用微焦點線球管。采用錐形線束代替扇形X線束,不僅能夠獲得真正各向同性的容積圖像,空間分辨率達1~10 μm,而且在采集相同三維圖像時速度遠遠高于普通CT。microCT能夠在不破壞樣品的情況下,對骨骼、牙齒、活體小動物和生物材料等進行高分辨率X線成像,利用強大的圖像處理軟件,可以觀察任意研究區,分割或合并多個三維圖像,定量計算樣品內部選定區域的體積、面積、空隙率、連接密度、結構模型指數、各向異性度等。根據已知密度的標準品(體模),還可以得到樣品的密度值(如BMD),分析物質的種類、組成、強度和完整性等參數,并進行三維有限元分析。在骨組織研究領域,microCT可以很好地研究骨結構和骨密度的數量性指標及微細改變,結合有限元分析方法能夠反映力學特性變化,并可指導組織工程、轉基因、血管顯影技術及主要臟器疾病的研究。
X線束焦點直徑5μm;磷酸感應屏:感光單元尺寸48 μm;CCD:2048 ×2048 ×14bit;雙信息處理器:帶形態和三維有限元分析系統;監控器:圖像矩陣512 ×512至2048 ×2048。
microCT在口腔種植領域研究中也顯示了很好的應用前景,主要應用于骨組織的研究,現就microCT在口腔種植領域的最新應用介紹如下。
Hounsfield等首次報道CT的臨床應用,醫學CT由原始的第一代CT發展到第五代高速電子束掃描CT。目前臨床上使用的多為螺旋CT,其缺點是費用較高、放射量較大。螺旋CT的掃描層厚最小單位為1mm,三維重建圖像精確,但只能顯示頜骨的立體表面形態,無法顯示頜骨的內部特征,而且存在金屬偽影影響影像質量。
microCT掃描除螺旋CT三維重建技術的優點外,最大特點是掃描辨析率能達14 μm,可以清楚地顯示頜骨的細微解剖結構。在此基礎上可同時進行頜骨矢狀面、冠狀面、水平面的多層面掃描,最高為320層。排除了人為因素干擾,減少了診斷誤差,為種植術前頜骨質量的檢查、測量、種植修復的設計、模型分析等方面提供更直接、更準確的信息。microCT三維重建技術通過數字減影技術,可進行多角度觀察,如旋轉、正面觀、側面觀、上面觀、底面觀等,還可以改變X線的投照角度進行三維圖像切割,使三維圖像顯示更佳。
Suomalainen等對一牙科診所6個月獲取198幅三維microCT圖像進行分析,將microCT圖像有效信息與曲面斷層片和口內X線片進行對比。其中49%microCT圖像用于種植體定位,3例由于根管充填、倒充填或金屬材料的影響形成偽影而未獲得所需的信息。其與傳統的影像學技術相比,可以補充更多的影像信息。
(一)骨結合研究方面的應用
1.micro CT 技術可行性:Butz 等應用micro CT 對種植體的骨結合進行三維分析。經酸蝕無螺紋的圓柱狀種植體植入大鼠右側股骨,兩周后micro CT 和組織學對比分析,在骨皮質(r =0.65,P <0.05)和距離種植體24 ~240 μm 的骨松質(r =0.92,P <0.05),兩者具有顯著的相關性。在距離種植體0 ~24 μm 的骨松質,兩者沒有顯著的相關性。結果顯示micro CT 快速無破壞性,對種植體骨結合進行三維分析具有可行性。但需要進一步的研究影響鄰近種植體骨測量的金屬偽影。我院金光春教授對骨結合的三維成像有相關研究(圖2)。
2.聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)的研制:有研究表明,表面鈦涂層的PMMA 種植體可以克服金屬偽影給種植體骨結合等研究帶來的影響。Shalabi 等應用micro CT 和組織學觀察對PMMA 周圍骨組織行為進行研究,400 ~500 nm 鈦涂層螺旋狀PMMA 植入羊的左右側脛骨,12 周后進行micro CT 分析、光學micro 鏡和X 線微量分析,結果顯示骨組織與種植體鈦涂層很好地結合。組織學觀察發現,種植體被機體所耐受沒有非典型的組織反應。PMMA 消除了micro CT 圖像鄰近種植體處的金屬偽影。
3.同步輻射micro CT 的應用:同步輻射micro CT(SRmicro CT)由同步加速器獲取高光子通量單色光代替傳統micro CT 的標準X 線而建立的一種新影像學技術。區別于傳統micro CT 的優點包括:應用單色光避免了非單色光成像時所形成的偽影,高光子通量可在短時間內獲取高信噪比、高空間分辨率的圖像,使用平行光束有利于進行圖像重建 。至今除SRmicro CT 外沒有其他的技術可以通過三維對骨礦物密度進行定量檢測。去除金屬偽影干擾的優點,SRmicro CT可更好地應用于骨結合研究。Bernhardt 等 將傳統micro CT 與SRmicro CT 對Ti6Al4V 種植體骨結合的分析進行對比,只有SRmicro CT 與組織學結果相符。傳統的micro CT 由于金屬偽影的影響,影響距離種植表面直至200 μm 的成像效果。另有Jung 等探討應用SRmicro CT 作為一種新的評價骨結合方法的可行性。實驗選取新西蘭大白兔,脛骨植入帶螺紋的鈦種植體,獲得的組織切片未經脫鈣,應用SRmicro CT、micro CT 和傳統的牙科X 線系統進行影像學分析,SRmicro CT 對愈合階段的骨結合情況比其他的影像學手段提供更為詳細的信息。
Chappard 等 對傳統的micro CT 與SRmicro CT 對人股骨頭骨小梁的微結構評價進行對比。雖然系統不同,但兩者具有高相關性,兩者的區別并不影響研究組之間的辨別結果。0.23 和0.45 轉速時micro CT 提供準確的人脫脂骨三維圖像,0.9 轉速時無法進行準確的骨微結構分析。
(二)種植體周圍骨組織微結構研究方面的應用
1.microCT技術的可行性:Rebaudi等通過實驗證明了應用microCT對種植體周圍骨組織研究的可行性。以含鈦螺旋種植體的活體組織為研究對象,以骨體積、骨面積、骨小梁厚度、骨小梁分離度、骨連接密度,以及上頜骨與植入體的附著關系作為參數,所有測量結果與標準的不脫鈣的組織形態學測量結果相似。VanOossterwyck等選用羊為實驗動物,對比分析種植體周圍骨組織結構,結果microCT與組織學分析相似,鄰近種植體的結合表面也未形成嚴重偽影。金光春教授應用microCT對骨微觀結構的描述與X線片形成鮮明的對比(圖2~4)。
2.microCT技術的應用:microCT分辨率達微米級可以完成更為精細的病理學診斷。老年患者普遍存在低蛋白攝入量的問題,影響骨結合并減緩骨折的愈合。Dayer等選取雌性小鼠,低蛋白和高蛋白飲食組作對照,鈦種植體植入脛骨,標本通過microCT組織形態測量評價骨結合和種植體周圍骨小梁的微結構。結論是低蛋白攝入量影響骨結合并改變種植體周圍骨組織微結構。Akca等應用切除卵巢小鼠研究不同生物學生理刺激作用下種植體周圍骨組織的微形態結構。結果顯示不同刺激作用下骨小梁厚度、骨小梁分離度沒有統計學意義,但骨小梁的數量差異有統計學意義。Gabet等在甲狀旁腺素1~34增加低密度骨小梁中種植體穩定性研究中,通過microCT對種植體周圍骨測量,主要參數包括骨小梁體積密度(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數量(Tb.N)、連接密度(Conn.D)。相同的標本進行拔出式生物力學測驗,結果證明骨組織微結構參數與生物力學參數具有顯著相關性,microCT對骨組織微結構的研究對生物力學能力有指導意義。Wiskott等使用控制式加荷方式對骨內種植體進行持續加力,用microCT分析顯示骨內種植體骨皮質反應分兩個階段:首先生成的是多孔薄層的骨皮質,接著形成大量密質骨,種植體周圍只形成大量的密質骨。為了證明具有骨誘導表面特性和骨誘導支架的種植體系統具有引導牙槽骨垂直生長的能力,Freilich等進行了相關研究。結果microCT測量含DBM與不含DBM支架組的牙槽骨垂直生長量分別為(2.1 ±0.9)mm和(0.8 ±0.9)mm(P=0.008),含DBM組組織學測量為(2.4 ±0.6)mm。可見,microCT測量結果與組織學相似。
(三)P種植體材料內部結構特征的描述:
Lima等應用microCT研究鈦種植體的內部結構特征,計算種植體參數,主要包括:材料體積和總體積比,材料表面和材料體積比,涂層厚度,涂層分離度,最優化的各向異性程度等。結果證明應用microCT分析這種微結構是可行的。
(四)生物力學研究方面的應用
1.三維形態測量數據:骨的力學行為是骨結合獲得與保持的一個關鍵因素。Fanuscu等利用microCT三維形態學分析尸體標本上下頜骨的骨小梁微結構,取適當吸收的牙齒缺失的人上下頜骨。microCT三維形態學分析獲取上下頜骨前部結構值域范圍:骨密度(0.12~0.291),骨小梁厚度(0.12~0.16mm),骨小梁分離度(0.46~0.82mm)。研究認為了解骨小梁的力學性能可以為種植的診斷、設計、手術技術等提供更多的信息。
2.三維有限元模型(FEM):以microCT為基礎建立的FEM可以作為一種生物力學分析工具定量天然骨和組織工程骨的應力應變。有限元分析法(FEAM)是一種理論力學的分析計算方法,建立能夠真實再現實體狀態的幾何模型是決定其研究結論是否具有科學性和實用價值的關鍵所在。由于microCT可獲取種植體周圍的骨小梁完整的數據,可以建立種植體系統的FEM,在骨小梁水平研究骨界面機械應力的傳遞。
李湘霞等模擬單個下頜磨牙缺失的種植修復,分析不同下頜骨形態對種植體唱骨界面應力分布的影響。方法采用三維有限元法,根據下頜骨測量資料建立不同頜骨截面形態的種植修復模型并進行分析。結果不論垂直載荷或斜向載荷,不同頜骨形態模型骨界面應力分布規律及應力值差異均無顯著性。其中Von唱Mises應力最大差異為6.4%,壓應力最大差異為2.8%,拉應力最大差異為6.2%。結論是在有限元研究中將下頜骨形態簡化為規則形態是合理的。
Cattaneo等通過microCT獲取圖像建立三維FEM描述口腔正畸用種植體周圍的應力和應變,并且評價應變與組織形態學測量參數觀測的生物學反應之間的關系。在4只成年獼猴第二前磨牙和第一磨牙植入共16枚種植體,17周愈合后,彈簧加力16周,處死后取含種植體和周圍骨組織的組織塊,microCT掃描后每個樣本單獨建立FEM后,組織形態測量分析。有限元分析種植體周圍牙槽骨的應力和應變因樣本不同呈多樣性。個體差異對于模系統力學性能和負載傳遞有重要的影響。
骨與種植體結合處負載的傳遞是全面分析負載的關鍵要素,對種植體的成敗起決定性作用,而應力分布取決于三維FEM的建立,其中模型的幾何學、材料性能、邊界條件、骨結合表面、更為準確的數字成像技術可以建立更接近真實的骨幾何形態,材料的非均質性也應該考慮。而microCT以其精確的成像技術能更好地建立三維FEM,進行力學分析對種植體的設計起指導作用。
microCT以快速、高分辨率、建立精確的三維FEM的成像,無破壞性對新鮮或修復組織進行組織形態學和生物力學研究。microCT在國內外口腔種植的應用尚處于起步階段,有廣闊的應用前景。
來源于齒道