口腔前沿:顯微CT在口腔種植研究領(lǐng)域中的應(yīng)用
空間分辨率達到1~10 μm的醫(yī)學(xué)CT稱為顯微CT(microCT),與之對應(yīng)的是肉眼分辨水平的CT,稱為宏觀CT。細胞直徑平均為10~50 μm,而細胞器約為0.2~1 μm。所以,microCT是“能看見組織和細胞圖像的CT”。由于普通CT無法滿足科學(xué)研究對分辨率的苛刻要求,學(xué)術(shù)界開始研發(fā)microCT。其主要構(gòu)造由六部分組成(圖1)。microCT與普通CT不同之處是采用微焦點線球管。采用錐形線束代替扇形X線束,不僅能夠獲得真正各向同性的容積圖像,空間分辨率達1~10 μm,而且在采集相同三維圖像時速度遠遠高于普通CT。microCT能夠在不破壞樣品的情況下,對骨骼、牙齒、活體小動物和生物材料等進行高分辨率X線成像,利用強大的圖像處理軟件,可以觀察任意研究區(qū),分割或合并多個三維圖像,定量計算樣品內(nèi)部選定區(qū)域的體積、面積、空隙率、連接密度、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)、各向異性度等。根據(jù)已知密度的標準品(體模),還可以得到樣品的密度值(如BMD),分析物質(zhì)的種類、組成、強度和完整性等參數(shù),并進行三維有限元分析。在骨組織研究領(lǐng)域,microCT可以很好地研究骨結(jié)構(gòu)和骨密度的數(shù)量性指標及微細改變,結(jié)合有限元分析方法能夠反映力學(xué)特性變化,并可指導(dǎo)組織工程、轉(zhuǎn)基因、血管顯影技術(shù)及主要臟器疾病的研究。
X線束焦點直徑5μm;磷酸感應(yīng)屏:感光單元尺寸48 μm;CCD:2048 ×2048 ×14bit;雙信息處理器:帶形態(tài)和三維有限元分析系統(tǒng);監(jiān)控器:圖像矩陣512 ×512至2048 ×2048。
microCT在口腔種植領(lǐng)域研究中也顯示了很好的應(yīng)用前景,主要應(yīng)用于骨組織的研究,現(xiàn)就microCT在口腔種植領(lǐng)域的最新應(yīng)用介紹如下。
Hounsfield等首次報道CT的臨床應(yīng)用,醫(yī)學(xué)CT由原始的第一代CT發(fā)展到第五代高速電子束掃描CT。目前臨床上使用的多為螺旋CT,其缺點是費用較高、放射量較大。螺旋CT的掃描層厚最小單位為1mm,三維重建圖像精確,但只能顯示頜骨的立體表面形態(tài),無法顯示頜骨的內(nèi)部特征,而且存在金屬偽影影響影像質(zhì)量。
microCT掃描除螺旋CT三維重建技術(shù)的優(yōu)點外,最大特點是掃描辨析率能達14 μm,可以清楚地顯示頜骨的細微解剖結(jié)構(gòu)。在此基礎(chǔ)上可同時進行頜骨矢狀面、冠狀面、水平面的多層面掃描,最高為320層。排除了人為因素干擾,減少了診斷誤差,為種植術(shù)前頜骨質(zhì)量的檢查、測量、種植修復(fù)的設(shè)計、模型分析等方面提供更直接、更準確的信息。microCT三維重建技術(shù)通過數(shù)字減影技術(shù),可進行多角度觀察,如旋轉(zhuǎn)、正面觀、側(cè)面觀、上面觀、底面觀等,還可以改變X線的投照角度進行三維圖像切割,使三維圖像顯示更佳。
Suomalainen等對一牙科診所6個月獲取198幅三維microCT圖像進行分析,將microCT圖像有效信息與曲面斷層片和口內(nèi)X線片進行對比。其中49%microCT圖像用于種植體定位,3例由于根管充填、倒充填或金屬材料的影響形成偽影而未獲得所需的信息。其與傳統(tǒng)的影像學(xué)技術(shù)相比,可以補充更多的影像信息。
(一)骨結(jié)合研究方面的應(yīng)用
1.micro CT 技術(shù)可行性:Butz 等應(yīng)用micro CT 對種植體的骨結(jié)合進行三維分析。經(jīng)酸蝕無螺紋的圓柱狀種植體植入大鼠右側(cè)股骨,兩周后micro CT 和組織學(xué)對比分析,在骨皮質(zhì)(r =0.65,P <0.05)和距離種植體24 ~240 μm 的骨松質(zhì)(r =0.92,P <0.05),兩者具有顯著的相關(guān)性。在距離種植體0 ~24 μm 的骨松質(zhì),兩者沒有顯著的相關(guān)性。結(jié)果顯示micro CT 快速無破壞性,對種植體骨結(jié)合進行三維分析具有可行性。但需要進一步的研究影響鄰近種植體骨測量的金屬偽影。我院金光春教授對骨結(jié)合的三維成像有相關(guān)研究(圖2)。
2.聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)的研制:有研究表明,表面鈦涂層的PMMA 種植體可以克服金屬偽影給種植體骨結(jié)合等研究帶來的影響。Shalabi 等應(yīng)用micro CT 和組織學(xué)觀察對PMMA 周圍骨組織行為進行研究,400 ~500 nm 鈦涂層螺旋狀PMMA 植入羊的左右側(cè)脛骨,12 周后進行micro CT 分析、光學(xué)micro 鏡和X 線微量分析,結(jié)果顯示骨組織與種植體鈦涂層很好地結(jié)合。組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),種植體被機體所耐受沒有非典型的組織反應(yīng)。PMMA 消除了micro CT 圖像鄰近種植體處的金屬偽影。
3.同步輻射micro CT 的應(yīng)用:同步輻射micro CT(SRmicro CT)由同步加速器獲取高光子通量單色光代替?zhèn)鹘y(tǒng)micro CT 的標準X 線而建立的一種新影像學(xué)技術(shù)。區(qū)別于傳統(tǒng)micro CT 的優(yōu)點包括:應(yīng)用單色光避免了非單色光成像時所形成的偽影,高光子通量可在短時間內(nèi)獲取高信噪比、高空間分辨率的圖像,使用平行光束有利于進行圖像重建 。至今除SRmicro CT 外沒有其他的技術(shù)可以通過三維對骨礦物密度進行定量檢測。去除金屬偽影干擾的優(yōu)點,SRmicro CT可更好地應(yīng)用于骨結(jié)合研究。Bernhardt 等 將傳統(tǒng)micro CT 與SRmicro CT 對Ti6Al4V 種植體骨結(jié)合的分析進行對比,只有SRmicro CT 與組織學(xué)結(jié)果相符。傳統(tǒng)的micro CT 由于金屬偽影的影響,影響距離種植表面直至200 μm 的成像效果。另有Jung 等探討應(yīng)用SRmicro CT 作為一種新的評價骨結(jié)合方法的可行性。實驗選取新西蘭大白兔,脛骨植入帶螺紋的鈦種植體,獲得的組織切片未經(jīng)脫鈣,應(yīng)用SRmicro CT、micro CT 和傳統(tǒng)的牙科X 線系統(tǒng)進行影像學(xué)分析,SRmicro CT 對愈合階段的骨結(jié)合情況比其他的影像學(xué)手段提供更為詳細的信息。
Chappard 等 對傳統(tǒng)的micro CT 與SRmicro CT 對人股骨頭骨小梁的微結(jié)構(gòu)評價進行對比。雖然系統(tǒng)不同,但兩者具有高相關(guān)性,兩者的區(qū)別并不影響研究組之間的辨別結(jié)果。0.23 和0.45 轉(zhuǎn)速時micro CT 提供準確的人脫脂骨三維圖像,0.9 轉(zhuǎn)速時無法進行準確的骨微結(jié)構(gòu)分析。
(二)種植體周圍骨組織微結(jié)構(gòu)研究方面的應(yīng)用
1.microCT技術(shù)的可行性:Rebaudi等通過實驗證明了應(yīng)用microCT對種植體周圍骨組織研究的可行性。以含鈦螺旋種植體的活體組織為研究對象,以骨體積、骨面積、骨小梁厚度、骨小梁分離度、骨連接密度,以及上頜骨與植入體的附著關(guān)系作為參數(shù),所有測量結(jié)果與標準的不脫鈣的組織形態(tài)學(xué)測量結(jié)果相似。VanOossterwyck等選用羊為實驗動物,對比分析種植體周圍骨組織結(jié)構(gòu),結(jié)果microCT與組織學(xué)分析相似,鄰近種植體的結(jié)合表面也未形成嚴重偽影。金光春教授應(yīng)用microCT對骨微觀結(jié)構(gòu)的描述與X線片形成鮮明的對比(圖2~4)。
2.microCT技術(shù)的應(yīng)用:microCT分辨率達微米級可以完成更為精細的病理學(xué)診斷。老年患者普遍存在低蛋白攝入量的問題,影響骨結(jié)合并減緩骨折的愈合。Dayer等選取雌性小鼠,低蛋白和高蛋白飲食組作對照,鈦種植體植入脛骨,標本通過microCT組織形態(tài)測量評價骨結(jié)合和種植體周圍骨小梁的微結(jié)構(gòu)。結(jié)論是低蛋白攝入量影響骨結(jié)合并改變種植體周圍骨組織微結(jié)構(gòu)。Akca等應(yīng)用切除卵巢小鼠研究不同生物學(xué)生理刺激作用下種植體周圍骨組織的微形態(tài)結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示不同刺激作用下骨小梁厚度、骨小梁分離度沒有統(tǒng)計學(xué)意義,但骨小梁的數(shù)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Gabet等在甲狀旁腺素1~34增加低密度骨小梁中種植體穩(wěn)定性研究中,通過microCT對種植體周圍骨測量,主要參數(shù)包括骨小梁體積密度(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)、連接密度(Conn.D)。相同的標本進行拔出式生物力學(xué)測驗,結(jié)果證明骨組織微結(jié)構(gòu)參數(shù)與生物力學(xué)參數(shù)具有顯著相關(guān)性,microCT對骨組織微結(jié)構(gòu)的研究對生物力學(xué)能力有指導(dǎo)意義。Wiskott等使用控制式加荷方式對骨內(nèi)種植體進行持續(xù)加力,用microCT分析顯示骨內(nèi)種植體骨皮質(zhì)反應(yīng)分兩個階段:首先生成的是多孔薄層的骨皮質(zhì),接著形成大量密質(zhì)骨,種植體周圍只形成大量的密質(zhì)骨。為了證明具有骨誘導(dǎo)表面特性和骨誘導(dǎo)支架的種植體系統(tǒng)具有引導(dǎo)牙槽骨垂直生長的能力,Freilich等進行了相關(guān)研究。結(jié)果microCT測量含DBM與不含DBM支架組的牙槽骨垂直生長量分別為(2.1 ±0.9)mm和(0.8 ±0.9)mm(P=0.008),含DBM組組織學(xué)測量為(2.4 ±0.6)mm。可見,microCT測量結(jié)果與組織學(xué)相似。
(三)P種植體材料內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征的描述:
Lima等應(yīng)用microCT研究鈦種植體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征,計算種植體參數(shù),主要包括:材料體積和總體積比,材料表面和材料體積比,涂層厚度,涂層分離度,最優(yōu)化的各向異性程度等。結(jié)果證明應(yīng)用microCT分析這種微結(jié)構(gòu)是可行的。
(四)生物力學(xué)研究方面的應(yīng)用
1.三維形態(tài)測量數(shù)據(jù):骨的力學(xué)行為是骨結(jié)合獲得與保持的一個關(guān)鍵因素。Fanuscu等利用microCT三維形態(tài)學(xué)分析尸體標本上下頜骨的骨小梁微結(jié)構(gòu),取適當吸收的牙齒缺失的人上下頜骨。microCT三維形態(tài)學(xué)分析獲取上下頜骨前部結(jié)構(gòu)值域范圍:骨密度(0.12~0.291),骨小梁厚度(0.12~0.16mm),骨小梁分離度(0.46~0.82mm)。研究認為了解骨小梁的力學(xué)性能可以為種植的診斷、設(shè)計、手術(shù)技術(shù)等提供更多的信息。
2.三維有限元模型(FEM):以microCT為基礎(chǔ)建立的FEM可以作為一種生物力學(xué)分析工具定量天然骨和組織工程骨的應(yīng)力應(yīng)變。有限元分析法(FEAM)是一種理論力學(xué)的分析計算方法,建立能夠真實再現(xiàn)實體狀態(tài)的幾何模型是決定其研究結(jié)論是否具有科學(xué)性和實用價值的關(guān)鍵所在。由于microCT可獲取種植體周圍的骨小梁完整的數(shù)據(jù),可以建立種植體系統(tǒng)的FEM,在骨小梁水平研究骨界面機械應(yīng)力的傳遞。
李湘霞等模擬單個下頜磨牙缺失的種植修復(fù),分析不同下頜骨形態(tài)對種植體唱骨界面應(yīng)力分布的影響。方法采用三維有限元法,根據(jù)下頜骨測量資料建立不同頜骨截面形態(tài)的種植修復(fù)模型并進行分析。結(jié)果不論垂直載荷或斜向載荷,不同頜骨形態(tài)模型骨界面應(yīng)力分布規(guī)律及應(yīng)力值差異均無顯著性。其中Von唱Mises應(yīng)力最大差異為6.4%,壓應(yīng)力最大差異為2.8%,拉應(yīng)力最大差異為6.2%。結(jié)論是在有限元研究中將下頜骨形態(tài)簡化為規(guī)則形態(tài)是合理的。
Cattaneo等通過microCT獲取圖像建立三維FEM描述口腔正畸用種植體周圍的應(yīng)力和應(yīng)變,并且評價應(yīng)變與組織形態(tài)學(xué)測量參數(shù)觀測的生物學(xué)反應(yīng)之間的關(guān)系。在4只成年獼猴第二前磨牙和第一磨牙植入共16枚種植體,17周愈合后,彈簧加力16周,處死后取含種植體和周圍骨組織的組織塊,microCT掃描后每個樣本單獨建立FEM后,組織形態(tài)測量分析。有限元分析種植體周圍牙槽骨的應(yīng)力和應(yīng)變因樣本不同呈多樣性。個體差異對于模系統(tǒng)力學(xué)性能和負載傳遞有重要的影響。
骨與種植體結(jié)合處負載的傳遞是全面分析負載的關(guān)鍵要素,對種植體的成敗起決定性作用,而應(yīng)力分布取決于三維FEM的建立,其中模型的幾何學(xué)、材料性能、邊界條件、骨結(jié)合表面、更為準確的數(shù)字成像技術(shù)可以建立更接近真實的骨幾何形態(tài),材料的非均質(zhì)性也應(yīng)該考慮。而microCT以其精確的成像技術(shù)能更好地建立三維FEM,進行力學(xué)分析對種植體的設(shè)計起指導(dǎo)作用。
microCT以快速、高分辨率、建立精確的三維FEM的成像,無破壞性對新鮮或修復(fù)組織進行組織形態(tài)學(xué)和生物力學(xué)研究。microCT在國內(nèi)外口腔種植的應(yīng)用尚處于起步階段,有廣闊的應(yīng)用前景。
來源于齒道
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