[摘要] 目的 比較經檸檬酸酸蝕后的釉質塊在不同再礦化時間后，刷牙對其表面磨損深度的影響。方法 60個釉質塊平均分為A~F共6組，分別安置在10個志愿者的腭基托上。實驗第1天，志愿者口腔中佩戴腭基托24 h，其后3d，每天進行刷牙實驗2次。

步驟如下：首先，用蜂蠟覆蓋F組釉質塊，將腭基托置于50 mL檸檬酸溶液中酸蝕2 min，然后取出腭基托，沖洗，并將F組釉質塊蜂蠟去除；其他組為酸蝕后經過不同的再礦化時間后刷牙（A組：0 min；B組：20 min；C組：40 min；D組：60 min；E組：酸蝕并且再礦化，但不刷牙；F組：不酸蝕，再礦化，刷牙）。進食及清潔時取出腭基托，其余時間均需佩戴腭基托。通過表面輪廓儀測量釉質塊的磨損深度，并用掃描電子顯微鏡（SEM）觀察其表面形貌。結果 酸蝕后經過不同時間的再礦化，刷牙對釉質塊表面造成的磨損深度不同，各組間的差異具有統計學意義（P<0.05）。SEM結果顯示，釉質酸蝕后再礦化時間越短，刷牙后表面凹陷越大越深越多，表面形態越粗糙。結論 釉質被酸蝕后，在唾液中再礦化時間增加，立即刷牙會對釉質表面形成較大的磨損，60 min后再刷牙可以有效減少刷牙對酸蝕釉質的磨損。

[關鍵詞] 刷牙磨損；酸蝕；再礦化；含氟牙膏

牙齒酸蝕癥是指在沒有細菌參與的情況下，由于酸的化學侵襲或螯合作用，牙體表面硬組織局部性、病理性、慢性進行性喪失的一種疾病。早期釉質脫礦可以被唾液再礦化修復，但如果在進食酸性飲料后立刻刷牙，就會導致牙齒結構的不可逆性喪失[1]。本研究目的是測定酸蝕后經過不同再礦化時間再刷牙對釉質造成的磨損深度，并進行組織學和形態學的觀察，為口腔保健提供理論依據。

1 、材料和方法

1.1 志愿者的選擇及培訓

經南昌大學附屬口腔醫院倫理委員會批準，征集10名志愿者，要求符合如下條件：1）年齡為20~30歲，身體健康，無全身系統性疾病；2）牙列完整，咬合良好，無活躍性齲壞，無牙周疾病；3）近1個月內無口腔及上呼吸道感染。

志愿者試驗期間需佩戴腭基托。試驗前對志愿者進行培訓，反復訓練，刷牙采用統一方法和統一力度，受試期間不使用任何抗齲或抗菌成分的藥物及漱口水，避免食用高氟食品、酸性食品及一切零食。進食時間和口腔清潔時間需將實驗腭基托取下來，置于50 mL人工唾液中，進食后用大量自來水漱口以清潔口腔（600 mL自來水漱口1 min），然后重新佩戴腭基托，除了這兩個時間段，其余時間腭基托均佩戴在口腔內。

1.2 實驗步驟

1.2.1 釉質塊的制備  收集新鮮拔除、健康無齲的正畸減數年輕前磨牙80顆，經體視顯微鏡觀察，要求無齲、無裂紋、無釉質發育不全等其他異常。牙齒清潔干凈，金剛砂片切取頰面釉質，砂紙拋光釉質面，制備成厚約2 mm、大小約5 mm×5 mm的釉質標本塊。超聲清洗、干燥，用維氏顯微硬度計HVS-1000進行3次顯微硬度測定，挑選出顯微硬度值最接近計算平均值的60個釉質塊進行研究[2]。將標本浸入10%甲醛溶液溶液（pH=7）中7 d，然后浸入0.1%麝香草酚飽和水溶液中待用。

1.2.2 檸檬酸溶液的配置  將0.042 g C6H8O7·H2O檸檬酸顆粒（分析純）加入到200 mL蒸餾水中，充分混勻、溶解，配置成濃度為0.001 mol·L-1、pH值約為3.20的實驗用檸檬酸溶液。

1.2.3 人工唾液的配置  采用ISO/TR1027:1993標準配置人工唾液：NaCl 0.4 g、KCl 0.4 g、CaCl2·2H2O 0.759 g、NaH2PO4·2H2O 0.78 g、Na2S·2H2O 0.005 g、Urea 1 g，溶于1 000 mL蒸餾水中，調整pH值至7.0，高壓消毒，置于4 ℃冰箱中保存備用。

1.2.4 牙膏和牙刷的選擇  牙膏選擇高露潔含氟牙膏（氟質量分數0.14%），牙刷選擇Oral-b軟毛牙刷。

1.2.5 口內腭基托的制備及實驗分組  為每個志愿者制作腭基托，上頜磨牙區制備6個6 mm×6 mm×2 mm的凹陷，隨機選擇釉質塊樣本，用蜂蠟固定于6個凹陷處，釉質面朝外，近遠中邊緣用樹脂固定，留下3 mm×5 mm的中央區域開窗區。60個釉質塊共分為A、B、C、D、E、F共6組，每組10個樣本。

1.2.6 唾液獲得性膜形成  實驗第1天，志愿者在口腔中佩戴各自的腭基托（24 h），以便釉質塊表面形成唾液獲得性膜。

1.2.7 酸蝕釉質  實驗第2天上午8:00進行第1次實驗。將腭基托從口內取出，沖洗，吹干，F組釉質塊表面覆蓋薄層蜂蠟，將腭基托置于50 mL檸檬酸溶液中酸蝕2 min，然后取出沖洗，并將F組釉質塊表面的蜂蠟去除。

1.2.8 再礦化與釉質磨刷  酸蝕后A組立即進行刷牙實驗。取豌豆大小（約0.3 g）牙膏，用牙刷對各個釉質塊統一方向統一力度（輕輕按壓，使牙刷毛與釉質塊成45°角，從釉質塊近中向遠中方向拂刷）磨刷40次（每秒刷1次，共40 s），然后沖洗干凈。志愿者口含20 mL雪碧，5 s后吞咽，而后將腭基托置入口腔內。再礦化20 min后將腭基托裝置從口內取出，沖洗干凈，對B組進行刷牙實驗（方法同A組），然后沖洗干凈，將腭基托重新置入口腔內。再礦化40 min后對C組進行刷牙實驗（方法同A組），然后沖洗干凈，將腭基托重新置入口腔內。再礦化60 min后對D組進行刷牙實驗（方法同A組），然后沖洗干凈，將腭基托重新置入口腔內。E組進行酸蝕和再礦化，但是不進行刷牙實驗。不同實驗組的具體方法見表1。

表 1 實驗分組及處理措施

1.2.9 循環操作  重復上述步驟1.2.7和1.2.8，完成一次完整的釉質酸蝕后刷牙再礦化實驗，每天進行兩次（上午8:00和下午8:00），共進行3 d；在第6次刷牙實驗后，取出各個釉質塊。

1.2.10 表面輪廓儀測量磨損深度  用AMBIOS-XP2型表面輪廓儀測量各個釉質塊的磨損深度。樹脂覆蓋的面作為基準面，取釉質塊中1/3處基準面和釉質塊刷牙磨損面之間的高度差作為磨損深度。輪廓儀針尖在釉質塊表面走過的距離中記錄3個讀數，取其平均值。單位為μm。

1.2.11 掃描電子顯微鏡（scanning electron microscope，SEM）觀察表面形貌  各組標本在FEIQuanta-200F型環境SEM下進行觀察，觀察釉質塊的表面形貌。

1.2.12 統計學處理  本實驗應用SAS 9.2軟件進行數據錄入和統計分析，6組間比較采用秩和檢驗，組間兩兩比較采用LSD法，檢驗水準為雙側α=0.05。

2 、結果

2.1 磨損深度

各組的磨損深度見表2：隨著釉質酸蝕后再礦化時間的增加，釉質表面的磨損深度逐漸減小，組間差異具有統計學意義（P<0.05）。

分析結果可見：

（1）刷牙會對酸蝕后的釉質表面造成磨損，A、B、C、D組釉質表面磨損深度與對照組E組比較，差異有統計學意義（P<0.05）；

（2）酸蝕對釉質表面磨損有影響，A、B、C、D組與對照組F組比較，磨損深度增加，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 SEM觀察

SEM下各組的表面形貌見圖1：酸蝕后立即進行刷牙（A組）的釉質塊表面呈現大量密集不平整的凹陷，凹陷程度較深；酸蝕后再礦化20 min再進行刷牙（B組）的釉質塊表面呈現散在分布凹陷，凹陷數量較A組的少，凹陷程度也較A組稍淺；酸蝕后再礦

化40 min（C組）再進行刷牙的釉質塊表面呈現少量凹陷；酸蝕后再礦化60 min再進行刷牙（D組）的釉質塊表面呈現較淺的散在的小凹陷；只進行酸蝕和再礦化，不進行刷牙實驗（E組）的釉質塊表面呈現小的點狀的凹陷；只進行再礦化和刷牙，不進

行酸蝕（F組）的釉質塊表面呈現較平整光滑的表面，無明顯凹陷。通過觀察6組釉質塊的SEM圖片可以看出，釉質被酸蝕后再礦化時間越短，其表面凹陷越大越深越多，表面形態越粗糙。

表 2 酸蝕后不同再礦化時間對磨損深度的影響

A：A組；B：B組；C：C組；D：D組；E：E組；F：F組。

圖 1 各組的表面形貌 SEM ×8000

3 、討論

酸性食物和酸性飲料的消費量增加已成為酸蝕癥患病率上升的一個重要影響因素[3]，牙酸蝕癥已成為一種常見的口腔疾病。當進食酸性食物或碳酸飲料后，釉質局部微環境的pH值下降至低于5.5時，硬組織中羥磷灰石晶體溶解破壞，表面脫鈣不僅直

接導致釉質的損失，同時也降低釉質表面的硬度和彈性模量，因此酸蝕后的釉質比起正常的釉質，更容易受到磨損和磨耗。

為了研究酸蝕癥和刷牙磨損之間的關系，眾多研究者設計出了各種不同的實驗方法來進行研究。實驗環境基本分為口腔內實驗、口腔外實驗和口腔內外聯合實驗。口腔外實驗由于要借助于人工唾液，而不同配比的人工唾液對實驗結果會有不同的影響

[4]，而且，口腔環境的復雜性和多樣性使得體外無法準確模擬口腔環境，而在實驗過程中，為了不使口腔中的其他牙齒處在被酸蝕的環境中，酸蝕釉質又不可能在口腔內進行，因此，建立口腔內外聯合實驗模型系統具有重要意義。本實驗采取口腔內

外聯合實驗模型，將釉質塊通過腭基托固定，再礦化步驟在口腔內進行，而酸蝕和刷牙磨損在口腔外進行。

在酸蝕發生的最初階段，釉質發生軟化，酸使釉質結構完整性發生改變，同時機械強度降低。在這個階段，軟化的釉質可以實現再礦化[5]。對軟化釉質再礦化最重要的因素是唾液和氟化物[6]。有研究[7]認為，唾液在碳酸飲料酸蝕釉質脫礦過程中通

過多種方式發揮著保護牙齒的作用。在口腔內，牙齒表面被覆著由唾液蛋白組成的獲得性膜。這層獲得性膜作為物理屏障，有保護釉質表面、抵抗酸蝕的作用，作為化學屏障，有緩沖飲料、降低飲料和牙齒界面pH值的作用[8-9]。此外，當飲料在口內

吞咽時，唾液的分泌可以緩沖口腔內pH值、促進酸在口內的消除，減少飲料作用于牙齒的時間，從而減少牙齒脫礦[10]。唾液的緩沖能力是對抗酸蝕癥發病機制中最重要的生物因子[11]。唾液中過飽和狀態的鈣和磷酸鹽，以及堿性或中性環境，是使

早期軟化釉質再礦化的先決條件[12]。唾液中鈣磷等常見離子的含量會對釉質和牙本質的礦物質產生影響，導致礦物質的溶解減慢[13]。研究[14-15]顯示，隨著再礦化時間的延長，刷牙對釉質牙本質表面造成的磨損深度逐漸減小，得出的結論是，進

食酸性飲料后60 min再刷牙對牙齒有較好的保護作用。本實驗研究結果和以往的研究結果一致，即隨著酸蝕后再礦化時間的延長，刷牙對釉質表面的損傷深度逐漸減小。

氟化物是公認的預防齲病的有效方法，其對酸蝕牙齒是否具有保護作用是近年研究的熱點。氟的酸蝕抑制作用機制主要表現在兩個方面，一方面氟離子（F-）與羥磷灰石晶體中的OH-發生交換，或者與口腔中的Ca2+和PO43-結合形成氟磷灰石，氟磷灰

石晶體在酸液中溶解的臨界pH值顯著低于羥磷灰石晶體，能提高牙齒的抗酸能力；另一方面，F-與游離Ca2+能結合生成氟化鈣沉淀（CaF2），阻止Ca2+的流失，為牙齒提供一個Ca2+的儲庫，當酸攻擊釉質時，釉質表面沉積的CaF2顆粒能夠中和酸，緩

沖口腔pH，成為酸攻擊時的暫時屏障[16-17]。含氟牙膏是一種非常普及的家庭及個人口腔衛生保健措施，使用含氟牙膏可大大提高口腔或牙面的氟離子水平，甚至在刷牙后10 h仍有明顯效果。有研究[18]表明，酸蝕牙齒在刷牙時，使用含氟牙膏能夠

增強軟化釉質的再礦化作用，與不含氟牙膏相比，能夠減少對釉質面的磨損[19]，從而對酸蝕的釉質起到更好的保護作用。Magalhaes等[20]發現，對酸蝕后的釉質刷牙時，使用質量濃度0.11%的含氟牙膏與非含氟牙膏相比，釉質磨損程度大約降低

30%。Moretto等[21]研究發現，與含0.11%氟化物牙膏相比，0.5%氟化物牙膏能明顯降低酸蝕后釉質的磨損。然而Rios等[22]研究發現，使用不含氟牙膏和含質量分數0.11%、0.5%的含氟牙膏對酸蝕后釉質的磨損并沒有明顯差異。本實驗發現，即使使

用含氟牙膏，在進食酸性飲料1 h后刷牙，對釉質也有一定的磨損。

綜上所述，酸蝕和刷牙磨損相互促進，被檸檬酸酸蝕過的釉質，刷牙是導致其表面釉質喪失的重要因素之一。釉質被檸檬酸酸蝕后立即刷牙對其損害最大，對釉質表面造成的磨損深度最大，可導致釉質表面粗糙不平整，形成密集的凹陷，因此進食碳

酸飲料或酸性食物后，不建議立即刷牙，即使使用含氟牙膏，間隔60 min刷牙造成的釉質磨損深度依然較不酸蝕直接刷牙造成的磨損深度大。唾液對酸蝕后的釉質再礦化有重要作用，被檸檬酸酸蝕過的釉質，經過的唾液再礦化時間越久，刷牙對其造

成的磨損深度越小；唾液對酸蝕后釉質的再礦化作用并不能完全抵消刷牙對其的磨損作用，但是進食酸性飲料60 min后再刷牙可以有效減少刷牙對酸蝕釉質的磨損。

來源： 陳麗培 歐曉艷 華西口腔醫學雜志