作者：程興群  周學(xué)東  徐欣（通信作者）

作者單位：口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 華西口腔醫(yī)院牙體牙髓病科（四川大學(xué)），成都 610041

[摘要]  唾液由口腔腺體分泌產(chǎn)生，具有清潔和保護(hù)口腔、抗菌、消化等多種功能。隨著唾液組學(xué)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)唾液是一個(gè)潛在的巨大生物標(biāo)志物儲(chǔ)存庫(kù)。唾液采集無(wú)侵襲性、可避免病毒傳播，有望成為血液的替代品。本文就關(guān)于唾液生化指標(biāo)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)和微生物等生物標(biāo)志物在口腔疾病、癌癥、糖尿病等全身系統(tǒng)性疾病早期診斷中的應(yīng)用，結(jié)合近期研究成果與學(xué)者觀點(diǎn)，闡述唾液在疾病早期診斷和精準(zhǔn)醫(yī)療中的應(yīng)用前景。

[關(guān)鍵詞]  唾液； 早期診斷； 口腔疾病； 系統(tǒng)性疾病；精準(zhǔn)醫(yī)療

唾液是齦溝液、黏膜滲出液、唾液腺腺泡超滲液的混合體，由口腔腺體分泌產(chǎn)生，具有清潔和保護(hù)口腔、抗菌、消化等多種功能。唾液腺滲透性高，周?chē)患?xì)血管，血液和腺泡可進(jìn)行分子交換，使得血液循環(huán)中的生物標(biāo)志物可滲透到腺泡，最終分泌到唾液中。人的唾液中99%成分是水，有機(jī)物主要是唾液淀粉酶、黏多糖、黏蛋白及溶菌酶等，無(wú)機(jī)物有鈉、鉀、鈣、氯和硫氰離子等。唾液使口腔濕潤(rùn)，可清潔口腔，沖洗殘留在口腔里的食物殘屑；可潤(rùn)滑食物，唾液淀粉酶在胃內(nèi)可分解食物中的淀粉為麥芽糖；唾液中的溶菌酶和硫氰離子具有殺菌作用；唾液還有排泄功能，如體內(nèi)碘化鉀、鉛、汞、狂犬病及脊髓灰質(zhì)炎病毒和艾滋病病毒等可經(jīng)唾液排泄或傳播。唾液是一個(gè)潛在的巨大生物標(biāo)志物儲(chǔ)存庫(kù)。唾液采集無(wú)侵襲性，采集人員不需要嚴(yán)格專(zhuān)業(yè)的醫(yī)學(xué)訓(xùn)練，不會(huì)出現(xiàn)采集血液時(shí)的緊張和疼痛，也可避免采集尿液樣本時(shí)出現(xiàn)的尷尬情景；唾液采集過(guò)程相對(duì)安全，可避免病毒的傳播，有望成為血液的替代品；唾液中富含DNA、RNA和蛋白質(zhì)信息以及豐富的微生物和多種代謝產(chǎn)物。這些優(yōu)勢(shì)使得學(xué)者們開(kāi)始探索唾液在疾病診斷中的作用。

1  唾液成分研究

唾液成分復(fù)雜，含有大量尿素、氨、尿酸、葡萄糖、膽固醇、脂肪酸、甘油二/三酯、中性脂質(zhì)、糖脂、氨基酸、類(lèi)固醇激素和黏蛋白、淀粉酶、凝集素、糖蛋白、溶菌酶、過(guò)氧化物酶、乳鐵蛋白和分泌型IgA、溶菌酶、髓過(guò)氧化物酶、富組蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制劑、黏蛋白G1和G2、防御素等；唾液中含有大量來(lái)自于血漿的Na+、Cl–、Ca2+、K+、HCO3–、H2PO4–、F–、I–、Mg2+等離子成分；同時(shí)，唾液中含有大量與口腔及全身系統(tǒng)性疾病相關(guān)的700多種微生物。

最新研究顯示，唾液成分的變化與機(jī)體病理生理狀態(tài)密切相關(guān)，被視為“人體健康狀態(tài)的窗口”。分析唾液成分變化可有效反映機(jī)體生理和病理狀態(tài)。隨著唾液相關(guān)研究的進(jìn)展，學(xué)者們提出了唾液組學(xué)的概念。唾液組學(xué)涵蓋了唾液基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、微生物組學(xué)、代謝組學(xué)和miRNA等領(lǐng)域研究?jī)?nèi)容，旨在探尋唾液中與疾病相關(guān)生物標(biāo)志物。Wong[1]建立了專(zhuān)業(yè)唾液組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（Salivaomics Knowledge Base，SKB），其是目前唯一致力于唾液組學(xué)研究的網(wǎng)站，搜集了大量人類(lèi)唾液生物學(xué)、藥物蛋白質(zhì)組學(xué)、藥物基因組學(xué)等研究方面的信息（http://www.skb.edu），并對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)管理。目前利用“唾液組學(xué)”技術(shù)，在唾液中先后發(fā)現(xiàn)了多種與口腔以及機(jī)體系統(tǒng)性疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物[2]。研究發(fā)現(xiàn)，囊性纖維化患者唾液中Ca2+、表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor，EGF）、前列腺素（prostaglandin，PG）E2等顯著升高；干燥綜合征患者唾液Na+、Cl–以及IgA、IgG升高，磷酸鹽水平降低。唾液中腫瘤標(biāo)志物是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者唾液中可檢測(cè)到c-erbB-2、CA15-3等腫瘤抗原，卵巢癌的唾液標(biāo)志物為CA125等。此外，心血管疾病、細(xì)菌和病毒感染性疾病等均可在唾液中檢測(cè)到相應(yīng)的生物標(biāo)志物。因此，系統(tǒng)研究唾液疾病相關(guān)生物標(biāo)志物不僅具有巨大的理論科學(xué)意義，還具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值和社會(huì)價(jià)值。

2  唾液診斷口腔疾病

2.1  齲病

齲病是口腔微生態(tài)失調(diào)引起的細(xì)菌性疾病。與齲病發(fā)生密切相關(guān)的細(xì)菌檢測(cè)，可以作為齲活躍性診斷的重要指標(biāo)。變異鏈球菌是公認(rèn)的齲病相關(guān)菌。唾液中變異鏈球菌和乳酸桿菌數(shù)目的增加與齲病患病率的增加密切相關(guān)。Samaranayake[3]采用刺激性唾液在選擇性培養(yǎng)基中孵育24h后發(fā)現(xiàn)，齲活躍人群的變異鏈球菌大于1×109 CFU·L-1，乳桿菌大于1×108 CFU·L-1；非齲活躍人群的變異鏈球菌小于1×108 CFU·L-1，乳桿菌小于1×107 CFU·L-1。唾液菌群的結(jié)構(gòu)和功能均可以作為預(yù)測(cè)成人齲病發(fā)生的標(biāo)記。Yang等[4]通過(guò)宏基因組學(xué)手段分析了19個(gè)齲活躍個(gè)體和26個(gè)無(wú)齲個(gè)體唾液微生物群落后發(fā)現(xiàn)，齲病組和無(wú)齲組人群的微生物群落構(gòu)成明顯不同，齲病個(gè)體唾液中普雷沃菌屬豐度較高，且其菌種分布與健康組之間有顯著差別。目前尚未發(fā)現(xiàn)齲病特異性運(yùn)算的分類(lèi)單位（operational taxonomic units，OTU），但發(fā)現(xiàn)了147個(gè)OTU與齲病相關(guān)，可作為評(píng)估齲病風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后的生物標(biāo)志物。學(xué)者[5]近期發(fā)現(xiàn)兒童口腔唾液和菌斑等位點(diǎn)菌群的結(jié)構(gòu)和功能均可反映齲病情況，首次提出了“齲病菌群指數(shù)”（microbial indicators of caries，MiC），該指數(shù)不僅可作為診斷口腔健康狀態(tài)的生物學(xué)指標(biāo)，也可在齲病臨床癥狀出現(xiàn)之前，預(yù)測(cè)齲病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。另外，單獨(dú)基于普雷沃菌屬與基于口腔微生物群落整體構(gòu)建的模型間疾病預(yù)測(cè)精準(zhǔn)度幾乎一致，提示普雷沃菌屬在齲病預(yù)測(cè)中具有重要價(jià)值[5]。唾液蛋白質(zhì)組的特異性變化也可用于鑒別齲病高危人群，如富脯氨酸以及組肽-1和富酪蛋白水平的下降與齲病發(fā)生密切相關(guān)。唾液的生化特性，如緩沖能力和pH值的變化也可作為評(píng)估齲病發(fā)生的指標(biāo)。基于高通量基因芯片和測(cè)序技術(shù)的唾液基因組、蛋白組和轉(zhuǎn)錄組研究有望在不久的將來(lái)進(jìn)一步揭示與齲病發(fā)生密切相關(guān)的生物標(biāo)志物。

2.2  牙周病

牙周病是口腔微生態(tài)失調(diào)引起的細(xì)菌感染性疾病，與全身等因素有著密切關(guān)系。牙齦卟啉單胞菌（Porphyromonas gingivalis，P. gingivalis）是慢性牙周炎的主要致病菌。近期有學(xué)者開(kāi)發(fā)了一種基于唾液P. gingivalis的診斷試劑盒，通過(guò)兩種特異性單克隆抗體，檢測(cè)唾液中的P. gingivalis。該試劑盒可檢測(cè)5×104~5×105個(gè)·mL-1濃度范圍內(nèi)的P. gingivalis實(shí)驗(yàn)室菌株和臨床分離株，且可在90 s內(nèi)得到結(jié)果。與逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）結(jié)果相比，該試劑盒檢測(cè)靈敏度達(dá)到92%，特異度可達(dá)96%，有望成為一種簡(jiǎn)單、快速、有效的椅旁檢測(cè)P. gingivalis工具[6]。近期一項(xiàng)研究檢測(cè)了健康人群、侵襲性牙周炎、慢性牙周炎、牙齦炎患者唾液和齦溝液中腎上腺髓質(zhì)素和一氧化氮水平，發(fā)現(xiàn)侵襲性牙周炎患者唾液中兩者水平顯著升高，慢性牙周炎、侵襲性牙周炎和牙齦炎患者齦溝液中一氧化氮水平升高，牙周炎患者齦溝液中腎上腺髓質(zhì)素水平高于牙齦炎組。上述研究結(jié)果提示，腎上腺髓質(zhì)素和一氧化氮在牙周病發(fā)病機(jī)制中存在一定聯(lián)系，兩者在唾液和齦溝液中的不同水平可能和不同種類(lèi)及不同嚴(yán)重程度的牙周病相關(guān)，有望成為診斷侵襲性牙周炎的潛在手段[7]。與齦溝液相比，唾液中一氧化氮及其終產(chǎn)物水平的檢測(cè)在牙周病的診斷中更有參考意義[8]。

吸煙是牙周病的危險(xiǎn)因素之一。研究[9]發(fā)現(xiàn)吸煙者唾液中超氧化物歧化酶水平與牙周炎臨床癥狀呈正相關(guān)關(guān)系，提示唾液有望成為早期診斷癌前病變的重要介質(zhì)。唾液中蛋白質(zhì)和代謝產(chǎn)物等分子也可能是潛在的牙周病診斷標(biāo)志物。研究發(fā)現(xiàn)可通過(guò)唾液中白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-6、基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-8、巨噬細(xì)胞炎性蛋白（macrophageinflammatory protein，MIP）-1α、PGE2和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）濃度對(duì)健康人群與牙齦炎和牙周炎患者進(jìn)行區(qū)分[10]。牙周炎患者唾液中總唾液酸量、Toll樣受體（Toll-like receptor，TLR）、IL-18、尿酸、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、降鈣素原水平高于正常健康組，并與牙齦指數(shù)、探診深度和附著水平正相關(guān)，有望成為診斷牙周病及其治療預(yù)后的新手段[11-13]。另外，有學(xué)者[14]開(kāi)發(fā)了一種漱口液，可通過(guò)檢測(cè)唾液中嗜中性粒細(xì)胞豐度來(lái)篩查牙周病，有望實(shí)現(xiàn)基礎(chǔ)研究成果的椅旁轉(zhuǎn)化應(yīng)用。

2.3  口腔癌

惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與特異性基因突變相關(guān)，血清、唾液和其他體液中的腫瘤特異性DNA標(biāo)志物可用于口腔和其他部位腫瘤的診斷。62.5%的口腔癌患者存在唾液DNA p53基因突變，在頭頸部癌癥患者的唾液和癌組織中存在著線粒體DNA質(zhì)量增加；手術(shù)切除腫瘤后，線粒體DNA質(zhì)量減少。在口腔癌患者的唾液中，腫瘤DNA檢出率為100%，其他部位腫瘤患者唾液中腫瘤DNA檢出率只有47%~70%；相反，血漿中可檢出80%口腔癌患者腫瘤DNA及86%~100%患其他部位腫瘤患者特異性DNA。上述結(jié)果提示唾液中來(lái)自于口腔的腫瘤DNA豐度較高，而血漿中來(lái)自其他部位的腫瘤DNA水平更高，唾液腫瘤DNA有望成為檢測(cè)口腔癌的潛在標(biāo)志物[15]。唾液中其他致癌病毒，如人類(lèi)免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiency virus，HIV）和人類(lèi)皰疹病毒（human herpesvirus，HHV）-8 DNA也可作為口腔或身體其他部位癌癥風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估[16]。Park等[17]檢測(cè)了50位口腔鱗狀細(xì)胞癌患者和50位健康者唾液miRNA水平，發(fā)現(xiàn)miR-125a和miR-200a兩種特異性miRNA在口腔鱗狀細(xì)胞癌患者唾液中水平明顯低于健康者，提示唾液miRNA可為疾病的早期診斷提供依據(jù)。

唾液中的蛋白質(zhì)也可用于腫瘤的檢測(cè)。唾液防御蛋白-1和腫瘤抗原CA15-3以及腫瘤標(biāo)志蛋白質(zhì)，如c-erbB2、CA-125和抗腫瘤P53抗體等水平的升高均可作為口腔和其他部位惡性腫瘤的生物學(xué)標(biāo)志[18]。研究顯示，透明質(zhì)酸酶、鳥(niǎo)苷蛋白和IL-6、IL-8可作為潛在的口腔鱗狀細(xì)胞癌生物學(xué)標(biāo)志物。在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌患者的唾液中，腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白（palate/lung/nasal epithelialcancer associated protein，PLUNC）和鋅-α2-糖蛋白過(guò)表達(dá)，且這兩種蛋白質(zhì)可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，有望成為頭頸部鱗狀細(xì)胞癌防治的潛在靶點(diǎn)[19]。近期研究發(fā)現(xiàn)口腔鱗狀細(xì)胞癌患者唾液中IL-4、IL-10、IL-13和白細(xì)胞介素1受體拮抗劑（interleukin 1 receptor antagonist，IL-1RA）等細(xì)胞因子升高，其中IL-10和IL-13顯著升高，IL-1RA在低分化鱗狀細(xì)胞癌中的水平顯著高于中度分化和高分化鱗狀細(xì)胞癌患者[20]。類(lèi)似研究發(fā)現(xiàn)中度和低度分化鱗狀細(xì)胞癌患者唾液中TNF-α水平顯著高于高分化鱗狀細(xì)胞癌和臨床Ⅳ期患者，且鱗狀細(xì)胞癌的組織學(xué)分級(jí)與TNF-α水平正相關(guān)[21]，提示唾液中細(xì)胞因子對(duì)于早期檢測(cè)口腔鱗狀細(xì)胞癌及對(duì)鱗狀細(xì)胞癌精準(zhǔn)醫(yī)療進(jìn)行有效分級(jí)具有重要意義。

隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)微生物在口腔癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用[22]。口腔癌患者唾液微生物機(jī)會(huì)性致病菌的豐度較健康人群顯著增加，不同腫瘤患者唾液微生物組的相似度較健康人群更高[23]。因此，對(duì)口腔菌群的檢測(cè)可能成為鱗狀細(xì)胞癌篩查的潛在方法。有學(xué)者[24]研究了3組口腔鱗狀細(xì)胞癌患者的唾液微生物，共發(fā)現(xiàn)8個(gè)門(mén)的微生物，主要包括壁厚菌門(mén)和桿菌門(mén)細(xì)菌；微生物的多樣性更加豐富，包括860個(gè)已知菌種和1 077個(gè)不可培養(yǎng)或未歸類(lèi)的菌種。上述研究結(jié)果提示，口腔癌的發(fā)生伴隨著口腔微生物群落結(jié)構(gòu)改變，口腔微生物群落結(jié)構(gòu)在口腔癌的早期診斷中具有潛在意義。

2.4  舍格倫綜合征

舍格倫綜合征是一種以口干和眼干為特征的自身免疫性疾病，患者常因口干首次就診于口腔門(mén)診。隨著病情發(fā)展，患者唾液流率逐漸降低，唾液成分也發(fā)生相應(yīng)變化，表現(xiàn)為鈉和氯離子濃度升高，鈣和磷離子濃度基本保持不變。舍格倫綜合征患者唾液蛋白組和轉(zhuǎn)錄組也呈現(xiàn)出相應(yīng)變化。研究[25]顯示，舍格倫綜合征患者唾液蛋白組中有6個(gè)顯著下調(diào)和10個(gè)顯著上調(diào)的蛋白質(zhì)；唾液中IL-4、IL-5和凝集素水平較正常人群發(fā)生顯著變化，上述因子在疾病預(yù)測(cè)方面具有較高準(zhǔn)確率。另一項(xiàng)研究[26]發(fā)現(xiàn)，19個(gè)基因（EPSTI1、IFI44、IFI44L、IFIT1、IFIT2、IFIT3、MX1、OAS1、SAMD9L、PSMB9、STAT1、HERC5、EV12B、CD53、SELL、HLA-DQA1、PTPRC、B2M、TAP2）與舍格倫綜合征病理形成過(guò)程中的干擾素誘導(dǎo)特性、淋巴細(xì)胞滲透作用和抗原呈遞等功能密切相關(guān)。Hu等[27]在原發(fā)性舍格倫綜合征患者唾液中發(fā)現(xiàn)了組織蛋白酶D、α-烯醇化酶和β2-微球蛋白三種蛋白質(zhì)標(biāo)志物以及髓細(xì)胞核分化抗原、鳥(niǎo)苷酸連接蛋白-2、IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb三種mRNA標(biāo)志物。上述唾液蛋白組和轉(zhuǎn)錄組研究結(jié)果為舍格倫綜合征的早期診斷提供了重要生物學(xué)標(biāo)記。

3  唾液輔助診斷全身系統(tǒng)性疾病

3.1  糖尿病

糖尿病是胰島素分泌缺陷和/或胰島素作用障礙所致的以高血糖為特征的代謝性疾病。研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者唾液中α-2-巨球蛋白（α-2-macroglobulin）水平顯著升高，血糖控制后其水平下降，提示唾液α-2-巨球蛋白水平檢測(cè)可用于反映糖尿病患者血糖控制情況[28]。有研究[29]發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者和牙周炎患者唾液中褪黑素水平下降，同時(shí)罹患糖尿病和牙周病患者的唾液中褪黑素濃度更低，提示褪黑素在糖尿病和牙周病的發(fā)病過(guò)程中具有重要作用，可能成為診斷和治療這兩種疾病的關(guān)鍵分子。Barnes等[30]檢測(cè)了健康人群和糖尿病患者伴有或不伴有牙周病的唾液代謝產(chǎn)物，共檢測(cè)到475種代謝物。牙周炎不伴有糖尿病患者唾液中細(xì)胞能量應(yīng)急標(biāo)志物水平、嘌呤降解水平、谷胱甘肽代謝、氧應(yīng)激相關(guān)標(biāo)志物、氨基酸水平、ω-3/ω-6脂肪酸水平均顯著上升。糖尿病患者唾液中葡萄糖和α-羥基丁酸水平上升，碳水化合物、脂類(lèi)和氧應(yīng)激相關(guān)標(biāo)志物變化顯著。上述代謝標(biāo)志物可應(yīng)用于牙周病和糖尿病的診斷、鑒別診斷、治療和預(yù)后評(píng)估。還有研究[31]檢測(cè)了2型糖尿病患者和健康人群唾液、血液中葡萄糖濃度和糖化血紅蛋白水平，發(fā)現(xiàn)兩者間存在正相關(guān)關(guān)系，提示可通過(guò)唾液監(jiān)測(cè)糖尿病患者血糖濃度。

3.2  心血管疾病

心血管疾病是一系列涉及循環(huán)系統(tǒng)的疾病，包括動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病等。Kosaka等[32]納入了608名日本男性和女性（平均年齡65.4歲）探究唾液炎性細(xì)胞因子和動(dòng)脈粥樣硬化、牙周病之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)唾液中IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2等炎性細(xì)胞因子水平在牙周病和動(dòng)脈粥樣硬化中均升高，是篩查和診斷這兩種疾病的潛在生物標(biāo)志物。Miller等[33]發(fā)現(xiàn)唾液中C反應(yīng)蛋白是最能預(yù)測(cè)急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）的標(biāo)志物，與心電圖聯(lián)用，預(yù)測(cè)AMI的敏感度為80%，特異度達(dá)100%，提示唾液標(biāo)志物與心電圖聯(lián)用在診斷AMI方面具有潛在前景，當(dāng)患者被懷疑患有AMI時(shí)，唾液相關(guān)檢測(cè)可提供許多信息。心血管疾病患者唾液中α-2-HS-糖蛋白水平增高，提示分析唾液中多肽可為早期診斷心血管疾病提供潛在分子手段[34]。

3.3  病毒感染

通過(guò)鑒定唾液中病毒DNA、RNA、抗原、抗體，可檢測(cè)病毒感染。在蛋白組學(xué)水平，通過(guò)檢測(cè)唾液中抗病毒抗體可確定相關(guān)病毒感染，如甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、HIV-1、麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒和流行性腮腺炎病毒等。一種名為OraQuick?®HCV的快速抗體檢測(cè)法可通過(guò)檢測(cè)唾液，快速篩查丙肝病毒感染[35]。此外，通過(guò)唾液檢測(cè)登革病毒RNA和非結(jié)構(gòu)蛋白1抗原（nonstructuralprotein 1 antigen）是一種診斷登革病毒感染的有效方法[36]。Nefzi等[37]發(fā)現(xiàn)對(duì)于HHV-6和人巨細(xì)胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV），唾液檢測(cè)比血液檢測(cè)更加靈敏。

3.4  胰腺癌

胰腺癌發(fā)病率低但致死率高，在西方國(guó)家每年新發(fā)生的癌癥總數(shù)中僅占3%，但致死率卻排在第4位[38]。因此，亟需在胰腺癌早期做出診斷和分類(lèi)，使患者獲得最佳治療時(shí)機(jī)。在嚙齒類(lèi)動(dòng)物的胰腺癌模型上，一種類(lèi)似外泌體（exosome）的囊泡可攜帶、傳遞和轉(zhuǎn)運(yùn)腫瘤特異性生物標(biāo)志物到唾液中[39]。研究發(fā)現(xiàn)胰腺癌患者的唾液中KRAS、MBD3L2、ACRV1和DPM1 4種mRNA可以有效區(qū)分胰腺炎患者與健康人群[40]。hsa-miR-210和let-7c在胰腺炎患者唾液中過(guò)表達(dá)；hsa-miR-21、hsa-miR-23a、hsamiR-23b、miR-29c和hsa-miR-216在胰腺癌患者唾液中表達(dá)上調(diào)，其中hsa-miR-23a和hsa-miR-23b在早期胰腺癌患者唾液中過(guò)表達(dá)[41]；miR-3679-5p和miR-940可用于有效檢測(cè)可切除胰腺癌[42]。唾液轉(zhuǎn)錄譜分析結(jié)果可用于區(qū)分胰腺癌患者和慢性胰腺炎患者及正常人，靈敏度達(dá)90%，特異度達(dá)95%[43]。

口腔微生物和牙周炎與胰腺癌發(fā)生密切相關(guān)。學(xué)者發(fā)現(xiàn)牙周炎與胰腺癌高危因素正相關(guān)，牙周炎患者患胰腺癌的概率比正常人高64%[44]。相對(duì)于健康人群，胰腺癌患者口腔中有31種細(xì)菌數(shù)量增加，25種細(xì)菌數(shù)量減少，其中長(zhǎng)奈瑟菌和緩癥鏈球菌在胰腺癌診斷中具有較高的靈敏性和特異性[45]。

3.5  乳腺癌

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。ATP6AP1是一種ATP酶，在骨髓、血液、神經(jīng)等正常組織內(nèi)表達(dá)，也存在于頭頸部腫瘤、肺癌、腎上腺腫瘤等中，但在乳腺癌中的分布最高。ATP6AP1自身抗體是在癌癥患者中自發(fā)形成的一種特異性抗體，在癌癥的早期可被檢出，有助于乳腺癌的早期診斷[46]。Arif等[46]擬設(shè)計(jì)一種檢測(cè)裝置，通過(guò)檢測(cè)唾液中的ATP6AP1自身抗體來(lái)篩查乳腺癌，以做出早期診斷和相應(yīng)治療。Zhang等[47]分析了唾液中潛在乳腺癌轉(zhuǎn)錄組和蛋白組生物標(biāo)志物，在唾液中發(fā)現(xiàn)了8種mRNA和1種蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物可用于檢測(cè)乳腺癌，靈敏度為83%，特異度為97%。近期一項(xiàng)研究[48]發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者唾液血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、癌胚抗原水平顯著上升。另有研究[49]發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者唾液和血清中CA15-3抗原和c-erB-2腫瘤標(biāo)志物水平上升，且兩者在唾液和血清中的水平正相關(guān)。因此，唾液中潛在生物標(biāo)志物在乳腺癌早期診斷方面具有潛在前景。

3.6  肺癌

肺癌發(fā)病率高，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。研究發(fā)現(xiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體突變是非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung carcinoma，NSCLC）的特異性標(biāo)志物。電場(chǎng)誘導(dǎo)釋放和檢測(cè)技術(shù)可利用多通道電化學(xué)傳感器直接檢測(cè)體液中的EGFR突變，是一種檢測(cè)NSCLC患者唾液中EGFR突變有效、準(zhǔn)確、廉價(jià)、便捷的方法。此外，Xiao等[50]以二維凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜在肺癌患者的唾液中檢測(cè)到了16種差異性表達(dá)蛋白質(zhì)，可有效區(qū)分肺癌患者和健康人群，為肺癌的早期診斷和治療預(yù)后提供了潛在標(biāo)志物。

3.7  前列腺癌

miR-141和miR-21是兩個(gè)腫瘤標(biāo)志物，前者在前列腺癌進(jìn)展期過(guò)表達(dá)，后者在癌癥早期過(guò)表達(dá)。學(xué)者[51]利用納米氧化石墨烯（nanographene oxide）技術(shù)同時(shí)檢測(cè)唾液中miR-141和miR-21的表達(dá)，其有望成為一種早期診斷前列腺癌的非侵襲性手段。

3.8  其他疾病

在胃潰瘍和慢性胃炎患者唾液中，可通過(guò)細(xì)菌DNA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)幽門(mén)螺桿菌感染[52-53]。通過(guò)檢測(cè)唾液中的咖啡因清除率，發(fā)現(xiàn)唾液作為診斷慢性肝病和評(píng)估患者剩余肝功能的有效手段[54]。慢性腎衰竭患者唾液中一氧化氮水平較健康人群升高，經(jīng)透析治療后，唾液中IgA、IgG和C反應(yīng)蛋白水平上升，提示唾液中IgA、IgG、C反應(yīng)蛋白和一氧化氮水平在腎病監(jiān)測(cè)中可發(fā)揮重要作用[55]。學(xué)者[56]發(fā)現(xiàn)唾液中檢測(cè)到的白血病融合轉(zhuǎn)錄本與患者骨髓中一致，提示唾液可以成為檢測(cè)白血病融合轉(zhuǎn)錄本的可靠和便捷手段。唾液中海藻糖是一個(gè)潛在的阿爾茲海默病（Alzheimer’s disease）生物標(biāo)志物，是一種基于細(xì)胞的晶體管生物傳感器，有望成為該病的潛在篩查手段。Wilson病是一種罕見(jiàn)的遺傳性銅代謝障礙疾病，表現(xiàn)為肝臟、神經(jīng)和精神癥狀。學(xué)者[57]對(duì)32個(gè)Wilson病患者唾液蛋白組進(jìn)行了定性和定量分析，發(fā)現(xiàn)多免疫球蛋白受體、α-防御素2和4水平增高。唾液蛋白組反映了患者疾病病理的氧應(yīng)激和炎癥狀態(tài)，可提供疾病惡化的重要線索。唾液皮質(zhì)醇水平是心理壓力的常規(guī)生物標(biāo)志物，唾液中3個(gè)已被驗(yàn)證的標(biāo)志物具有早期診斷特異性皮炎的潛能。

4  亟待解決的問(wèn)題

唾液樣本易于采集、儲(chǔ)存方便、DNA質(zhì)量高，在流行病學(xué)研究中是血液的良好替代品，具有很高的研究?jī)r(jià)值。唾液組學(xué)研究對(duì)于尋找疾病分子標(biāo)志物和藥物靶標(biāo)具有重要意義，對(duì)于疾病的早期診療具有難以估量的前景。目前唾液在疾病診斷中的研究與應(yīng)用尚處于早期探索階段，相關(guān)數(shù)據(jù)較零散，亟待克服諸多障礙，建立唾液分子檢測(cè)平臺(tái)，規(guī)范系列研究實(shí)施及評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，將我國(guó)巨大的患者資源轉(zhuǎn)化為促進(jìn)臨床診療技術(shù)進(jìn)步的戰(zhàn)略資源，建立系統(tǒng)的唾液組學(xué)知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，尋找更加精準(zhǔn)的疾病預(yù)警標(biāo)志物，深入認(rèn)識(shí)口腔及全身健康的關(guān)聯(lián)，為實(shí)現(xiàn)口腔與全身疾病的精準(zhǔn)醫(yī)療提供準(zhǔn)確、無(wú)痛和便捷的平臺(tái)，最終將基礎(chǔ)研究成果轉(zhuǎn)化為臨床椅旁檢測(cè)技術(shù)，為推動(dòng)實(shí)現(xiàn)全民口腔健康做出更大的貢獻(xiàn)。

來(lái)源：《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2016年12月第34卷第6期