有人提出抑制壓力相關的情緒反應，會導致同時激活自主神經系統（ANS）的交感神經和副交感神經系統，并且這些情緒狀態的表達對潰瘍形成具有保護作用。本研究旨在研究大鼠壓力引起的磨牙癥活動（SBA）。評估應激期間咀嚼肌EMG活動和SBA的生理影響，例如各種組織和器官應激引起的變化。

材料和方法

動物

       在控制溫度（22±3℃）和照明條件（12:12小時光照：黑暗循環）下，將35只雄性Wistar大鼠（7-8周齡）分組飼養（每籠5只），提供食物和水。為了避免晝夜變化帶來的激素變化對細胞因子表達的影響，我們在1000-1500小時之間進行了所有實驗。

約束應激和SBA測量

       通過將大鼠仰臥位固定在木板（18×25cm）上形成約束應激（20只大鼠）。四條腿都用膠帶固定在身體中線45°的方向。實驗組大鼠暴露于約束應激360分鐘。對照組大鼠沒有暴露于約束條件，且能夠自由獲取食物和水（15只大鼠）。

        為了記錄SBA的長度，將針狀電極直接插入雙側咬肌以供EMG（EMG，SN700，Tecno Science，Tokyo，Japan）記錄。肌電圖顯示肌肉活動; 我們測量了SBA的持續時間。

標本的制備

       在360分鐘的約束后，在全身麻醉下通過心臟穿刺抽血。取血樣并在室溫下凝結10分鐘，然后離心以獲得血清樣品。立即儲存等分的血清并在-80℃下冷凍直至使用。取出脾臟和胸腺并稱重（濕重），然后在10％福爾馬林溶液中浸泡固定，隨后進行組織學切片以觀察組織學變化。胃也被移除以評估潰瘍形成。

測量胃部病變

       沿著大彎將胃剖開，并作為新鮮標本固定在紙板上。在新鮮時，通過解剖顯微鏡評估胃損傷的嚴重程度。評分包括發紅區域的數量和累積長度以及充滿凝血的離散腺體病變。我們還使用視覺分析系統（WinRoof，5.5版，日本東京都三谷商事;圖1）測量了胃粘膜的發紅區域（RAS）。記錄每只動物最不發白以及胃粘膜表面紅潤部分的不同顏色值（即紅色，綠色和藍色）。通過最發白區域值減去最發紅區域值來計算截止值。這種差異被分成兩半，并加到最高的紅色值。然后，粘膜表面的紅色區域被視為RAS。在RAS可視化之后，將胃浸入10％福爾馬林溶液中，然后進行組織學切片以觀察組織學變化。

測量血液腎上腺素和皮質醇水平

       分析血清樣品以評估腎上腺素和皮質醇水平。皮質醇水平用皮質醇放射免疫測定法（RIA）試劑盒（Immunotech，USA），使用如前所述的抗皮質醇小鼠單克隆抗體測定。

       用高效液相色譜法分離兒茶酚胺（特別是血中的腎上腺素）。樣品通過陽離子交換預柱通過以除去水溶性物質，然后使用HLC-8030柱（Toso，Tokyo，Japan）分離兒茶酚胺。之后，測量由二苯基乙二胺和鐵氰化鉀產生的熒光，其中激發波長λex= 355nm，發射波長λem= 470nm。

測量血液白細胞

       血液白細胞，特別是中性粒細胞與淋巴細胞的比例，是交感神經系統免疫應激反應的指標。對于白細胞部分，通過外周血涂片（Wright-Giemsa染色）和顯微鏡細胞計數評估嗜中性粒細胞，淋巴細胞，單核細胞和嗜堿性粒細胞。計算白細胞部分中嗜中性粒細胞和淋巴細胞的比例。

結果

SBA

       約束應激動物顯示出一定長度的SBA，非應激動物不顯示SBA。將大鼠的活動錄像。這項研究是在9:00至15:00期間完成的，對大鼠來說這不是一個活躍的時間。在這段時間內，未被約束的大鼠多半會睡覺或吃東西。盡可能地排除與進食和飲食有關的咬肌活動。在6小時的束縛應激中，個體SBA從19.77分鐘到1.37分鐘（0.23-3.30分鐘/小時）不等（圖2）。平均SBA在此期間為8.06±5.02分鐘。

肉眼觀察脾臟和胸腺

脾和胸腺明顯受到約束應激的影響。與對照組相比，經歷6小時約束應激的大鼠的脾臟和胸腺重量顯著較低（P = 0.05）（圖3）。在組織學和肉眼觀察中，觀察到相對于對照組，胸腺皮質減少，胸腺骨髓增加以及白脾髓減少（圖3）。然而，胸腺和脾臟的重量與SBA持續時間成正比增加; 胸腺（P = 0.032）和脾臟（P = 0.0002）的這種相關性具有統計學意義（圖4）。

SBA和血液白細胞

在360分鐘的束縛應激中，中性粒細胞的百分比逐漸增加，而淋巴細胞的百分比逐漸減少（圖5）。血液白細胞中的嗜中性粒細胞與淋巴細胞的比例在束縛應激的240分鐘時反轉，并持續至試驗結束。相反，SBA減弱了應激誘導的嗜中性粒細胞/淋巴細胞平衡變化（圖6）。

SBA，血液腎上腺素和皮質醇水平

束縛應激的大鼠顯示相對于對照組大鼠的皮質醇和腎上腺素水平增加（1.20±0.30），盡管這些增加被SBA減弱（圖7）。血中腎上腺素水平與血液白細胞中性粒細胞百分比顯著相關（R =0.604，P<0.01;圖8）。 RAS和中性粒細胞在血液白細胞中的百分比也有很強的相關性（R = 0.835，P<0.01;圖8）

SBA和潰瘍形成

6小時的束縛應激后，形成各種胃潰瘍（圖9a）。 SBA持續時間與RAS顯著相關（R = -0.6746，P<0.01），表明SBA對應激性潰瘍形成有保護作用（圖9b）。

結論

        這項研究表明，SBA可減輕應激引起潰瘍的發生以及胸腺和脾臟的退行性改變。同時，SBA減少了血液中腎上腺素，皮質醇和嗜中性粒細胞的釋放或增加。總之，暴露于應激的情況下，通過SBA，減弱了應激誘發的ANS應答，包括胃潰瘍形成。

討論

        以前的研究證實了咀嚼功能障礙對抑制應激誘導的神經生理反應變化的下調作用。例如，束縛應激時，大鼠下丘腦和室旁核中Fos表達，自由基消耗，磷酸化ERK1/2表達，促腎上腺皮質激素釋放因子表達和神經元一氧化氮合酶表達增加。

        本研究是針對SBA而不是人為咬合的效果，并支持如下觀念，即情緒狀態的變化反映在肌肉緊張，特別是咀嚼肌緊張。

       可以推測，咬合行為將轉移壓力情境產生的消極情緒（焦慮和/或恐懼），從而減少壓力造成不利影響。如果這個假設適用于人類，那么通過像睡眠磨牙癥這樣的應對機制，可能對減少神經官能癥的發生有益，如應激產生的潰瘍或神經疾病。

來源：浙一口腔正畸林軍